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序号 |
实验项目
名称 |
实 验 内 容 |
学时 |
要求 |
性质 |
类别 |
所用主要仪
器及台套数 |
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1 |
1．层析技术
2．蛋白质的分离纯化与鉴定 |
1.熟悉层析技术的原理、分类及应用范围。2.掌握离子交换层析的基本原理、过程及树脂的应用。3.掌握凝胶层析的基本原理、特点和应用。4.学习粗提盐法、用SephadexG25脱盐法和用离子交换剂进行蛋白质的纯化。5。用醋酸纤维素薄膜电泳法进行蛋白质的鉴定。 |
7 |
必做 |
综合 |
基础 |
部分收集器8台、恒流泵8台、紫外检测仪8台、记录仪8台，离心机12台、层析柱100支、天平8台。电泳仪20台、电泳槽20台、镊子 |
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2 |
1．离心技术
2．核酸的分离和含量测定 |
1．熟悉离心技术的基本原理。2.掌握离心力及其作用。3.了解离心机的分类和构造。4.掌握常用离心机使用方法和注意事项。5.学习核酸的分离方法、核酸的组成及生物学特性，了解RNA、DNA的提取和含量测定方法。 |
7 |
必做 |
综合 |
基础 |
电动匀浆器4台、离心机12台、分光光度计12台、电热恒温水浴锅8台。天平8台。 |
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3 |
酶的提取及比活性测定 |
1．掌握酶提取纯化的方法和技术以及应注意的问题。2.了解测定碱性磷酸酶活性的原理和方法。3.掌握紫外分光光度计的使用方法。4.了解蛋白质测定在医学中的应用。 |
7 |
必做 |
综合 |
基础 |
电动匀浆器4台、离心机12台、紫外分光光度计12台、电热恒温水浴锅8台。天平8台。 |
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4 |
底物浓度对酶促反应速度的影响 |
本实验以碱性磷酸酶为例，测定不同浓度底物时的酶活性，再根据Lineweaver-Burk法作图，计算其Km值。 |
2 |
必做 |
验证 |
基础 |
电动匀浆器4台、分光光度计12台、电热恒温水浴锅8台。天平8台。 |
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5 |
pH对酶促反应速度的影响 |
本实验以磷酸苯二钠为底物，在不同pH值的甘氨酸缓冲液条件下，测定碱性磷酸酶的活性，从而确定其最适pH值。 |
2 |
必做 |
验证 |
基础 |
电动匀浆器4台、分光光度计12台、电热恒温水浴锅8台。天平8台。 |
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6 |
温度对酶促反应速度的影响 |
本实验以碱性磷酸酶为例，在不同温度下保温一定时间，观察酶活性的差别。 |
1 |
必做 |
验证 |
基础 |
电动匀浆器4台、分光光度计12台、电热恒温水浴锅8台。天平8台。 |
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7 |
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血LDH同工酶 |
掌握电泳分离同工酶的方法并了解其原理.了解显色乳酸脱氢酶活性的原理.了解血清乳酸脱,氨酶同工酶电泳分离的临床意义. |
2 |
必做 |
必做 |
基础 |
电泳仪24台、电泳槽24台、电热恒温水浴锅8台。 |
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8 |
胰岛素对血糖含量的影响及测定 |
1．熟悉激素对血糖含量的影响因素。2.学习邻甲苯法测定血糖的原理，了解测定血糖的方法。 |
1 |
必做 |
验证 |
基础 |
离心机12台、恒温水浴锅4台。 |
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9 |
糖酵解中间产物的鉴定 |
1．复习糖酵解的主要中间步骤及其产物，2.了解一碘醋酸对3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用。 |
1 |
必做 |
验证 |
基础 |
分光光度计12台、电热恒温水浴锅8台。天平4台。 |
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10 |
血清脂类薄层层析 |
1．学习脂类薄层层析法的具体操作。
2．了解薄层层析在脂类成份分析及脂代谢研究中的用途。 |
1 |
必做 |
验证 |
基础 |
层析缸24个，电烤箱4台、电热恒温水浴锅4台、 |
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11 |
1．
电泳技术。
2．
血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 |
1．熟悉电泳技术的基本原理。2.掌握影响电泳的因素(介质、缓冲溶液、电场强度、电渗等)。3.掌握电泳技术的应用，了解电泳的分类。4.掌握正常人血浆脂蛋白的分类。 |
2 |
必做 |
综合 |
基础 |
微波炉4台、电泳仪24台、电泳槽24台、镊子24把、微量加样器4支。 |
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12 |
氨基转换作用GPT测定 |
掌握血清谷丙转氨酶活性测定的方法及临床意义。 |
1 |
必做 |
验证 |
基础 |
电热恒温水浴锅8台、可见光分光光度计12台。 |
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13 |
血清尿素氮测定 |
学习尿素测定的方法。 |
1 |
必做 |
验证 |
基础 |
电热恒温水浴锅8台、可见光分光光度计12台。 |
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14 |
1．分子生物学技术。2.感受态的转化和鉴定 |
1.掌握DNA提取、转染、PCR、核酸杂交、DNA重组等生物学技术和方法。2.掌握感受态的转化和鉴定。 |
7 |
选做 |
综合 |
基础 |
振荡培养箱4台、电热恒温水浴锅、高速离心机2台、可见光分光光度计12台。恒温培养箱4台。净化工作台 |
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15 |
质粒的提取及鉴定 |
1．质粒的提取及电泳鉴定，2.掌握PUC18质粒的提取和电泳技术。 |
7 |
必做 |
综合 |
基础 |
振荡培养箱4台、冷冻干燥仪1台、高速台式离心机12台、电泳仪24台、电泳槽24台、紫外透射仪4台。 |
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16 |
酶切及酶切鉴定 |
掌握限制性内切酶的特点及应用。 |
7 |
选做 |
综合 |
专业 |
冷冻干燥仪1台、紫外透射仪4台。 |
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17 |
DNA的回收及重组鉴定 |
学习DNA的回收方法及重组子的连接技术. |
7 |
选做 |
综合 |
专业 |
恒温培养箱4台、PCR仪4台、振荡培养箱4台。 |
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18 |
SDS-PAGE测定蛋白质分子量 |
在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂SDS，测蛋白质的相对分子量。 |
4 |
选做 |
综合 |
专业 |
电泳仪24台、垂直电泳槽8台、脱色摇床4台。 |
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19 |
等电聚焦测测定蛋白质等电点 |
根据蛋白质在不同pH环境中所带净电荷等于零时，将蛋白质分离。 |
3 |
选做 |
综合 |
专业 |
电泳仪24台、等电聚焦电泳槽8台、脱色摇床4台。 |
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20 |
免疫转移电泳 |
用PAGE法分离蛋白质，把PAGE凝胶块用电泳方法转移到NC膜上，在NC膜上进行免疫学和生化学检测。 |
10 |
选做 |
演示 |
专业 |
电泳仪24台、电转移槽4台、脱色摇床4台。 |
